Бер адым RT-qPCR SYBR яшел премикс
Мәче No: HCB5140A
Бер адым RT-qPCR Syber Green Premix - SYBR Green I буяу нигезендә флюоресенция күләме өчен.Ген специфик праймериз кулланып, кире транскрипция һәм qPCR реакцияләре бер трубада тәмамлана, кат-кат ачу һәм пипетинг операцияләре кирәклеген бетерә, анализ эффективлыгын яхшырта һәм пычрану куркынычын киметә.РНК үрнәкләре өчен комплект җылылык чыдамлы Кире Транскриптаз куллана, эффектив CDNA синтезы һәм сан көчәйтү өчен HotStart Taq DNA полимерасы.Оптимальләштерелгән буфер системасы нигезендә, комплектның сизгерлеге югары күрсәтелгән максатлар өчен 0,1 пг, уртача күрсәтелгән максатлар өчен 1 пг кадәр булырга мөмкин.Комплект ДНК үрнәкләрен көчәйтү һәм санлаштыру өчен яраклы.Бу төрле үсемлек һәм хайван үрнәкләреннән, күзәнәкләрдән һәм микроорганизмнардан нуклеин кислоталарын сизгер табарга һәм санлаштырырга мөмкинлек бирә.
Компонентлар
| No | Исем | Том | Том |
| 1 | Алга киткән буфер | 250 μЛ | 2 × 1,25 мл |
| 2 | Алга киткән фермент катнашмасы | 20 μЛ | 200 μЛ |
| 3 | RNase Free H.2O | 250 μЛ | 2 × 1,25 мл |
Саклау шартлары
Бу продукт 1 ел яктылыктан -25 ~ -15 ℃ ераклыкта сакланырга тиеш.
Инструкция
1. Реакция системасы конфигурациясеd
| Компонентлар | Күләм (μL) | Күләм (μL) | Соңгы концентрация |
| Алга киткән буфер | 12.5 | 25 | 1 × |
| Алга киткән фермент катнашмасы | 1 | 2 | - |
| Алга Праймер (10 μмол / Л)a | 0,5 | 1 | 0,2 ммол / Л. |
| Кире пример (10 μмол / Л)a | 0,5 | 1 | 0,2 ммол / Л. |
| РНК Тамплатb | X | X | - |
| RNase Free H.2О.c | 25кә кадәр | 50 гә кадәр | - |
Искәрмәләр:
1) а.Т.ул соңгы праймер концентрациясе 0,2 ммол / Л иде, ул шулай ук 0,1 - 1μmol / L арасында көйләнергә мөмкин.
2) б.Реагент бик сизгер, Тоталь РНК 1pg-1μg диапазонында, һәм кеше үрнәкләрен сынау 1 pg-100 ng оптималь керүне күрсәтте, гомуми Ct бәясен 15-30 диапазонында контрольдә тотты.
3) в.Максатлы ген көчәйтүнең дөреслеген һәм репродуктивлыгын тәэмин итү өчен 20μL яки 50μL кулланырга киңәш ителә.
4) г.Зинһар, ультра чиста эскәмиядә әзерләнегез һәм нуклеаз калдыксыз киңәшләр һәм реакция трубаларын кулланыгыз.фильтр патроннары белән киңәшләр тәкъдим ителә.Кросс пычранудан һәм аэрозол белән пычранудан сакланыгыз.
2.Реакция программасы
| Cyикл адымы | Темп. | Вакыт | Cyикллар |
| Кире транскрипция | 50 ℃a | 6мин | 1 |
| Башлангыч денатурация | 95 ℃ | 5мин | 1 |
| Көчләндерү реакциясе | 95 ℃ | 15 сек | 40 |
| 60 ℃b | 30 сек | ||
| Эретү этапы | Инструмент җитешсезлекләре | 1 | |
Искәрмәләр:
1) а.Кире транскрипция температурасы эксперимент ихтыяҗлары буенча 50-55 ° C арасында сайланырга мөмкин.ДНК үрнәкләре өчен кире транскрипция процессын калдырырга мөмкин.
2) б.Махсус очракларда аннальинг / киңәйтү температурасы ТМ бәясе буенча көйләнергә мөмкин, 60 ° C тәкъдим ителә.
Искәрмәләр
1. Бу продукт тикшерү өчен генә.
2. Зинһар, сезнең куркынычсызлыгыгыз өчен лаборатория пальто һәм бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар белән эшләгез.
