2 × Тиз Так Супер Микс
Мәче No: HCR2016A
2 × Тиз Так Супер Микс үзгәртелгән Так ДНК Полимеразына нигезләнгән, көчле киңәйтү факторын, көчәйтү көчәйтү факторын һәм оптимальләштерелгән буфер системасын өстәп, супер югары көчәйтү эффективлыгы белән.3 кб эчендә геном кебек катлаулы шаблоннарның көчәйтү тизлеге 1-3 сек / кбга җитә, һәм 5 кб эчендә плазмид кебек гади шаблоннар 1 сек / кбга җитә.Бу продукт PCR реакция вакытын бик саклый ала.Шул ук вакытта, катнашмада dNTP һәм Mg2 + бар, алар праймерлар һәм шаблоннар өстәп кенә көчәйтелә ала, бу экспериментның эш адымнарын да җиңеләйтә.Моннан тыш, катнашмада электрофоретик күрсәткеч буягы бар, ул реакциядән соң туры электрофорез булырга мөмкин.Бу продукттагы саклагыч агент катнашуны кат-кат туңдырудан һәм эретүдән соң тотрыклы активлык саклый.PCR продуктының 3-очлы A төркеме T векторына җиңел клонлаштырылырга мөмкин.
Компонентлар
2 × Тиз Так Супер Микс
Саклау шартлары
PCR Master Mix продуктлары -25 ~ -15 at 2 ел сакланырга тиеш.
Характеристикалар
| Продукция спецификасы | Тиз супер микс |
| Концентрация | 2 × |
| Кайнар старт | Эчке кайнар старт |
| Overзгәртеп кору | 3′-А |
| Реакция тизлеге | Тиз |
| Размер (соңгы продукт) | 15 кб кадәр |
| Транспорт шартлары | Коры боз |
Инструкция
1. Реакция системасы (50 μЛ)
| Компонентлар | Размер (μL) |
| Шаблон ДНК * | яраклы |
| Алга праймер (10 μмол / Л) | 2.5 |
| Кире праймер (10 μmol / L）) | 2.5 |
| 2 × Тиз Так Супер Микс | 25 |
| ddH2O | 50 гә кадәр |
2.Көчәйтү протоколы
| Cyикл адымнары | Температура (° C) | Вакыт | Cyикллар |
| Алдан уйлану | 94 | 3 мин | 1 |
| Денатурация | 94 | 10 сек |
28-35 |
| Аннальинг | 60 | 20 сек | |
| Киңәйтү | 72 | 1-10 сек / кб |
Төрле шаблоннарны куллану тәкъдим ителә:
| Шаблон төре | Сегмент куллану диапазоны (50 μЛ реакция системасы) |
| Геном ДНК яки Э.Коли сыеклыгы | 10-1000 нг |
| Плазмид яки вируслы ДНК | 0,5-50 нг |
| cDNA | 1-5 µL (PCR реакциясенең гомуми күләменең 1/10 дан артык түгел) |
| Төрле шаблоннарны кулланырга тәкъдим ителә | |
Искәрмәләр:
1.Реагент куллану: кулланганчы тулысынча эретегез һәм кушыгыз.
2. Аннальинг температурасы: Аннальинг температурасы универсаль Tm кыйммәте, һәм шулай ук примерның Tm кыйммәтеннән 1-2 ℃ түбәнрәк куелырга мөмкин.
3. Озайту тизлеге: 1 кб эчендә геном һәм Э.Коли кебек катлаулы шаблоннар өчен 1 сек / кб куегыз.1-3 кб геном һәм Э.Коли кебек катлаулы шаблоннар өчен 3 сек / кб куегыз;3 килограммнан артык геном һәм Э.Колидан катлаулы шаблоннар өчен 10 сек / кб куегыз.Сез гади шаблон өчен кыйммәтне 1 сек / кб итеп куя аласыз, мәсәлән, 5 килограммнан ким булмаган плазмид, 5 сек / кб гади шаблон өчен 5-10 кб арасындагы плазмид, гади шаблон өчен 10 сек / кб. 10 кбтан зуррак плазмид кебек.
Искәрмәләр
1. Сезнең куркынычсызлыгыгыз һәм сәламәтлегегез өчен зинһар, лаборатория пальто һәм бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар киегез.
2. Бу продукт бары тик тикшерү өчен генә!
