Мультиплекс Бер адым RT-qPCR Премикс-УНГ
Мәче No: HCB5145A
Мультиплекс Бер адым RT-qPCR Проб комплекты (UDG Plus) - шаблон буларак РНК нигезендә мультиплекс санлы PCR комплекты.Эксперимент барышында кире транскрипция һәм санлы PCR бер трубада үткәрелде, бу эксперименталь операцияне гадиләштерде һәм пычрану куркынычын киметте.Бу комплектта беренче CDNA җылылыкка чыдам Кире Транскриптаз белән эффектив синтезланган һәм HotStart Tag DNA Полимерасы белән сан ягыннан көчәйтелгән.Комплектта нигездә оптимальләштерелгән MP буферы, ферментлар катнашуы һ.б. бар. Буфер эремәсендә Mg бар2+һәм dNTP.Моннан тыш, специфик булмаган PCR көчәйтүне эффектив тыя ала һәм күп санлы qPCR реакцияләренең көчәйтү эффективлыгын яхшырта алган факторлар өстәлә, алар көчәйтү эффективлыгын тәэмин итә һәм берничә көчәйтү реакциясен башкара ала.Аэрозол белән пычрану куркынычын эффектив булдырмас өчен DUTP / UDG системасы өстәлде.
Компонентлар
1. Буфер
2. Фермент катнашмасы
Спецификация
| Кайнар старт | Эчке кайнар старт |
| Ачыклау ысулы | Праймер-зонаны ачыклау |
| PCR ысулы | Бер адым RT-qPCR |
| Полимераз | Так ДНК полимерасы |
| Ampleрнәк төре | ДНК |
Саклау шартлары
Продукция коры боз белән җибәрелә һәм -25 ~ -15 atта 1 ел сакланырга мөмкин.Ул еш булмаска тиештуңдыру.Аерым сакларга киңәш ителә.
Инструкция
1.Реакция Система
| Компонентлар | Күләм (μL) | Соңгы концентрация |
| 2 × MP Буфер | 12.5 | 1 × |
| Фермент катнашмасы | 1 | - |
| Праймер / Проб катнашмасы (2,5 μМ) | 3 | 0.3μM |
| Шаблон РНК | 1-10 | - |
| Ирекле H2O | 25кә кадәр | - |
Искәрмәләр:
Куллану алдыннан яхшылап катнашырга онытмагыз, көчле тибрәнү аркасында килеп чыккан артык күперләрдән сакланыгыз.
а.Пример концентрациясе: оптималь пример концентрациясенә карап, мультиплекс праймерны кертеп, пример катнашмасы, бәлки, 0.l белән 1,0μM арасында.
б.Проб концентрациясе: мультиплекс зонаның маркировкасы аермасы флуоресцент группасын кертеп, оптималь зонаның концентрациясенә карап, бәлки, 0,05 - 0,5μМ арасында.
в.Шаблонны эретү: qPCR бик сизгер һәм шаблонны эретергә киңәш ителә.Контроль Ct бәясе 20 белән 35 арасында туры килә.
г.Система әзерләү: Зинһар, ультра чиста эш өстәлендә, пипетторда һәм нуклеаз калдыксыз реакция трубасында әзерләгез.мылтык башын фильтр элементы белән кулланырга киңәш ителә.Кросс пычранудан һәм аэрозол белән пычранудан сакланыгыз.
2. Оптималь велосипедПротокол
| Cyикл адым | Темп. | Вакыт | Cyикллар |
| Кире транскрипция | 50 ℃а | 20мин | 1 |
| Башлангыч-денатурация | 95 ℃ | 5мин | 1 |
| Көчләндерү реакциясе | 95 ℃ | 15сек |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30сек c |
Искәрмәләр:
а.Кире транскрипция: температура 42 ° C яки 50 ° C сайлый ала.
б.Көчәйтү реакциясе: Температура эшләнгән праймерларның Tm кыйммәте буенча көйләнә.
в.Флуоресцент сигнал алу: Зинһар, эксперимент процедурасын инструмент кулланмасы таләпләренә туры китереп куегыз.
Искәрмәләр
Сәламәтлекне һәм куркынычсызлыкны тәэмин итү өчен лаборатория пальто һәм перчатка кебек кирәкле PPE киегез.
