Рназ ингибиторы (Глицерол бушлай)
Murine RNase ингибиторы - рекомбинант мурин RNase ингибиторы, E.coliдан күрсәтелгән һәм чистартылган.Ул A, B яки C RNase белән ковалент булмаган бәйләнеш аша 1: 1 нисбәтендә бәйләнә, шуның белән өч ферментның эшчәнлеген тыя һәм РНКны деградациядән саклый.Ләкин, Аспергиллдан RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H яки RNase каршы эффектив түгел.Murine RNase ингибиторы RT-PCR, RT-qPCR һәм IVT mRNA белән сынады, һәм төрле коммерция Кире транскриптазлар, ДНК полимеразлары һәм РНК полимеразалары белән туры килде.
Кеше RNase ингибиторлары белән чагыштырганда, RNase ингибиторында ике цистин юк, алар ингибиторның инактивлашуына китерә торган оксидлашуга бик сизгер.Аны DTTның аз концентрацияләрендә тотрыклы итү (1 ммнан да азрак).Бу үзенчәлек аны реакциядә куллану өчен яраклаштыра, анда DTT концентрацияләре реакциягә тискәре (мәсәлән, Real-time RT-PCR).
Aүтенеч
Бу продукт теләсә нинди экспериментта киң кулланылырга мөмкин, анда RNase интерфейсы РНК деградациясен булдырмаска мөмкин, мәсәлән:
1.Беренче катлы CDNA синтезы, RT-PCR, RT-qPCR һ.б.;
2. РНКны витро транскрипция / тәрҗемәдәге деградациядән саклагыз (мәсәлән, витрода вируслы репликация);
3. РНК изоляциясе һәм чистарту вакытында RNase эшчәнлеген тыю.
Саклау шартлары
-25 ～ -15 at саклагыз;
Суыту цикллары ≤ 5 тапкыр;
1 ел.
Берәмлекне билгеләү
Бер агрегат RNase A ингибиторының 5 нг RNase A эшчәнлеген 50% ка тыю өчен кирәк.
Молекуляр авырлык
RNase ингибиторы (Глицеролсыз) - 50 kDa протеин.
Сыйфат белән идарә итү
Экзонуклаз Эшчәнлек:
40 μ U ферментның 1 μg λ-Hind III ашказаны ДНКны 16 сәг.
Эндонуклаз эшчәнлеге:
40 μ ферментның 1 μг λ ДНК белән инкубациясе 16 сәгать 37 ° C тәэсирендә, гель электрофорезы белән билгеләнгән ДНКның ачыкланмаган деградациясенә китермәде.
Ник Эшчәнлек:
40 μ U ферментының 1 μg pBR322 белән 16 сәгать эчендә 37 at инкубациясе, гель электрофорезы белән билгеләнгән ДНКның ачыкланмаган деградациясенә китермәде.
RNase Эшчәнлек:
40 U ферментны 1,6 μг MS2 РНК белән 4 сәгатьтә 37 at инкубацияләү, гел электрофорезы белән билгеләнгән РНКның деградациясенә китермәде.
E.coli DNA:
40 U фермент TaqMan qPCR тарафыннан ачыклана.E.coli ДНК ≤ 0. 1pg / 40U.
Notes
1. Ферментны инактивлаштырмас өчен, селкетмәгез, каты селкетмәгез.
2.RNase ингибиторы 25 55 55 temperatures температурада актив һәм ≥65 at актив булмаган.
3. RNase H, RNase 1, RNase T1 эшчәнлеге комачауламый.
4. RNase эшчәнлеген тыю өчен pH диапазоны киң (pH 5-9 актив), pH 7-8 максималь активлыгын күрсәтә.
