DNase I (Rnase Free) (2у / ул)
Мәче No: HC4007B
DNase I - бер яки ике катлы ДНКны сеңдерә ала торган эндонуклаз.Ул 5'-фосфат төркеме һәм 3'-OH группасы булган моно-һәм олигодоксинуклеотидлар чыгару өчен фосфодистер бәйләнешләрен гидролизлый ала.DNase I оптималь эш pH диапазоны 7-8.DNase I эшчәнлеге Ca белән бәйле2+һәм CO кебек дивалент металл ионнары белән активлаштырырга мөмкин2, Mn2+, Zn2+, һ.б. Mg булганда2+, DNase Мин ике катлы ДНК сайтларын очраклы рәвештә чистарта алам;Мн булганда2+, DNase Мин бер үк мәйданда ике катлы ДНКны ябыштыра алам, 1-2 нуклеотидлар белән озын очлар яисә ябыштыргыч очлар барлыкка китерә алам.Аны төрле РНК үрнәкләрен эшкәртү өчен кулланырга мөмкин.
Компонентлар
| Исем | 1КУ | 5КУ |
| Рекомбинант DNaseI (RNaseсыз) | 500 μЛ | 5 × 500 μЛ |
| DNase I реакция буферы (10 ×) | 1 мл | 5 × 1мл |
Саклау шартлары
Бу продукт -25 ~ -15 at 2 ел сакланырга тиеш.Зинһар, кат-кат туңудан сакланыгыз.
Инструкция
Белешмә өчен РНК үрнәкләреннән ДНКны бетерү өчен кулланыла.
1. Зинһар, түбәндәге реакция системасын әзерләү өчен RNaseсыз центрифуга трубаларын һәм пипетта киңәшләрен кулланыгыз:
| Компонентлар | Күләм (μL) |
| DNase I реакция буферы (10 ×) | 1 |
| Рекомбинант DNasel (RNaseсыз) | 1 |
| РНК | X |
| RNase-ddH2O | 10га кадәр |
2. Реакция шартлары түбәндәгечә: 37 ℃, 15-30 минуттан соң, 2,5 мм EDTA эремәсенең соңгы концентрациясен кушыгыз һәм яхшылап кушыгыз, аннары 65 10 10 минутка.Эшкәртелгән шаблон алдагы RT-PCR яки RT-qPCR экспериментлары өчен кулланылырга мөмкин.
Искәрмәләр
1. DNase l физик денатурациягә сизгер;Аралашканда, сынау трубасын әкрен генә кире борыгыз һәмяхшы селкетегез, көчле селкетмәгез.
2. Фермент кулланылганда боз тартмасында яки боз мунчасында сакланырга тиеш, һәм кулланганнан соң -20 at сакланырга тиеш.
3. Бу продукт тикшеренүләр өчен генә.
4. Зинһар өчен, лаборатория пальто һәм бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар белән эшләгез.
