Мультиплекс qPCR Проб премикс
Мәче No: HCB5051A
TaqMan мультиплекс qPCR Master Mix (буяу нигезендә) - 2 × реаль вакытта санлы PCR көчәйтү өчен алдан чишелеш, югары сизгерлек һәм үзенчәлек белән характерланган, зәңгәр төстә, һәм үрнәк өстәү эффектына ия.Бу продукт 2 × катнаш катнаш реагент, ул бер реакциядә дүрт флуоресцент санлы PCR реакциясенә мөмкинлек бирә.Бу продуктта генетик үзгәртелгән антитела ысулы бар, кайнар старт Так ферменты, көчәйтү сизгерлеген һәм үзенчәлеген яхшырта.Шул ук вакытта, бу продукт реакциянең көчәйтү эффективлыгын күтәрә ала һәм аз концентрацияле шаблоннарның эффектив көчәйтүенә ярдәм итә алган күп реакцияле буферны тирәнтен оптимальләштерде.Бу продукт генотип ясау һәм мультиплекс санлы анализ өчен кулланылырга мөмкин.
Спецификация
| Кайнар старт | Эчке кайнар старт |
| Ачыклау ысулы | Праймер-зонаны ачыклау |
| PCR ысулы | qPCR |
| Полимераз | Так ДНК полимерасы |
| Ampleрнәк төре | ДНК |
Саклау шартлары
Продукция коры боз белән җибәрелә һәм -25 ~ -15 at 2 ел сакланырга мөмкин.
Инструкция
1. РеакцияСистема
| Компонентлар | Күләм (μL) | Соңгы концентрация |
| 2 × TaqMan мультиплекс qPCR Master Mix | 12.5 | 1 × |
| Пример катнашмасы (10 μмол / Л) a | × | 0,1 - 0,5 ммол / Л. |
| Проб катнашмасы (10 μмол / Л)b | × | 50 - 250 нмол / Л. |
| Рокс белешмә буяу | 0,5 | 1 × |
| Шаблон ДНК / cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | 25 гә кадәр | - |
Искәрмәләр:Көчле селкенүдән артык күперләр булмасын өчен, кулланганчы яхшылап кушыгыз.
а.Пример концентрациясе: Пример Микс берничә пар праймерны үз эченә ала, гадәттә һәр праймер соңгы концентрациядә 0,2 ммол / Л, шулай ук тиешенчә 0,1 - 0,5 ммол / Л арасында көйләнергә мөмкин.
б.Проб концентрациясе: Проб Микс төрле флуоресцент сигналлары булган берничә зонаны үз эченә ала, һәм һәр зонаның концентрациясе конкрет ситуация буенча 50 - 250 nmol / L арасында көйләнергә мөмкин.
1.Рокс буяу белешмәсе: Бу реаль вакыт PCR көчәйтү коралында кулланыла, шулай ук Гамәли биосистемалар, скважиналар арасында барлыкка килгән флуоресцент сигнал хатасын төзәтү өчен;бу продуктта Rox буяу сылтамасы юк.Кас # 10200 кирәк булса тәкъдим ителә.
2.Шаблонны эретү: qPCR бик сизгер, һәм куллану өчен шаблонны эретергә киңәш ителә.Шаблон cDNA акция чишелеше булса, шаблон күләме гомуми күләмнең 1/10 дан артмаска тиеш.
3.Реакция системасы: максатлы ген көчәйтүнең эффективлыгын һәм кабатлануын тәэмин итү өчен 25μL, 30μL яки 50 μL тәкъдим ителә.
4.Система әзерләү: Зинһар, супер чиста эскәмиядә әзерләгез, һәм нуклеаз калдыклары булмаган киңәшләрне һәм реакция трубаларын кулланыгыз.киңәшләрне фильтр патроннары белән кулланырга киңәш ителә.Кросс пычранудан һәм аэрозол белән пычранудан сакланыгыз.
2.Реакция программасы
| Cyикл адымы | Темп. | Вакыт | Cyикллар |
| Башлангыч-денатурация | 95 ℃ | 5мин | 1 |
| Денатурация | 95 ℃ | 15сек | 45 |
| Аннальинг / киңәйтү | 60 ℃ | 30сек |
Искәрмәләр:
1.Аннальинг / киңәйтү: Температура һәм вакыт Tm проектланган праймер бәясе буенча тиешенчә көйләнергә мөмкин.
2.Флуоресцент сигналны алу: Төрле qPCR ачыклау кораллары өчен кирәк булган флуоресцент сигналны алу вакыты төрле, зинһар, минималь вакыт чикләренә туры китерегез.Берничә уртак коралның вакыты түбәндәгечә куелган:
20 сек: Гамәли биосистемалар 7700, 7900HT, 7500 Тиз
31 сек: Гамәли биосистемалар 7300
32 сек: Гамәли биосистемалар 7500
Искәрмәләр
Сәламәтлекне һәм куркынычсызлыкны тәэмин итү өчен кирәкле PPE, шундый лаборатория пальто һәм перчаткалар киегез!
