RT-LAMP Колорметрик Мастер Микс HCB5204A
Бу продуктта реакция буферы, РТ-ферментлар катнашмасы (Bst DNA полимерасы һәм җылылыкка чыдам кире транскриптаз), лиофилизацияләнгән протеантлар һәм хромоген буяу компонентлары бар.Куллану өчен, Баферны кулланыгыз, реакция ферменты һәм праймер катнаш һәм шаблонга кушыла;лиофилизацияләнгән саклагыч өстәү туры булырга мөмкин.Ул лиофилизаторга тоташтырылган һәм лиофилизацияләнгән, һәм кулланганда праймерлар һәм шаблоннар гына өстәлгән.Бу комплект көчәйтүнең тиз, ачык визуаль табылуын тәэмин итә, тискәре реакция кызыл төстә, уңай реакция сары төс белән күрсәтелә.
Компонент
| Компонент | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Loop-mediated көчәйтү буферы (буяу белән) | 0,96 мл | 4.80 мл × 2 | 9,60 мл × 10 |
| ТР-ферментлар катнашмасы | 270 μЛ | 2.70 мл | 2.70 мл × 10 |
| Лиофилизацияләнгән саклаучы | 0,96 мл × 2 | 9,60 мл × 2 | 9,60 мл × 20 |
Кушымталар
ДНК яки РНК изотермаль көчәйтү өчен.
Саклау шартлары
Коры боз белән ташылган, -25 ~ -15 at сакланган.Еш кына туңдырудан сакланыгыз, продукт 12 ай дәвамында эшли.
Протокол
1.Бүлмә температурасында кулланылачак реакция буферын эрегез.Вортекс кыска яки трубаларны берничә тапкыр әйләндереп, яхшылап катнашырга, аннары центрифуга труба төбенә сыеклык җыярга.
2.Реакция системасын әзерләү.Бу реагент ике реакция системасында, сыек реакция катнашмасы һәм лиофилизацияләнгән система катнашмасында әзерләнергә мөмкин.
1) Сыек реакция катнашмасын әзерләгез
| Компонент | Том |
| Loop-mediated көчәйтү буферы (буяу белән) | 10 μЛ |
| ТР-ферментлар катнашмасы | 2,8 μЛ |
| 10 × Пример Миксa | 5 μЛ |
| Шаблоннар ДНК / РНК b | × μL |
| Нуклеизсыз су | 50 μЛ кадәр |
2) Лиофилизация системасы катнашмасы
Ly Лиофилизацияләнгән катнашма әзерләгез
| Компонент | Том |
| Loop-mediated көчәйтү буферы (буяу белән) | 10 μЛ |
| Лиофилизацияләнгән саклаучы | 20 μЛ |
| ТР-ферментлар катнашмасы | 2,8 μЛ |
| Нуклеизсыз су | 50 μЛ кадәр |
② Лиофилизация: әзерләнгән Микс 50μL системасында лиофилизацияләнде
Reaction Реакция катнашмасын әзерләгез
| Компонент | Том |
| Лиофилизацияләнгән катнашма | 1 кисәк |
| 10 × Пример Миксa | 5 μЛ |
| Шаблоннар ДНК / РНК b | × μL |
| Нуклеизсыз су | 50 μЛ кадәр |
Искәрмәләр:
1) а.10 × Пример катнашмасы: 16 μM FIP / BIP, 2 μM F3 / B3, 4 μM Loop F / B;
2) б.DEPC (суда эри торган) нуклеин кислотасы шаблоны өчен тәкъдим ителә.
1.65-45 минутта 65 ° C инкубацияләгез, бу төс үзгәрү реакция вакытына туры китереп озайтылырга мөмкин.
2.Ялган күз буенча сары уңай, кызыл тискәре иде.
Искәрмәләр
1.Тоз буфер трубасы төбендә, вортекс кыска яки бүлмә температурасында яхшылап катнашу өчен торбаларны берничә тапкыр әйләндерергә мөмкин.
2.Реакция температурасы праймерларның торышына карап 62 ℃ белән 68 between арасында оптимальләштерелергә мөмкин.
3.Пакетланган реагентлар озак вакыт һавага тәэсир итмәскә тиеш.
4.Кызыл һәм сары төссезләнү реакциясе реакция системасының pH үзгәрүенә бәйле, зинһар, ddH кулланырга тәкъдим ителгән Tris нуклеин кислотасы саклау эремәсен кулланмагыз.2О сакланган нуклеин кислотасы;
5.Эксперимент стандартлаштырылырга тиеш, шул исәптән реакция системасын әзерләү, лиофилизация, үрнәк эшкәртү һәм үрнәк өстәү процессы.
6.Пычратудан саклану өчен, реакция системасын ультра чиста эскәмиядә әзерләргә киңәш ителә, ялган позитив комачауламас өчен, бүлмәнең төтен капкасына шаблоннар өстәргә.
