Bst 2.0 ДНК полимерасы (Глицерол ирекле, югары тыгызлык)
Bst DNA полимераз V2 Bacillus stearothermophilus DNA полимераз I-дән алынган, аның 5 ′ → 3 ′ ДНК полимераз активлыгы һәм чылбырны алыштыру активлыгы бар, ләкин 5 ′ → 3 ′ экзонуклаз активлыгы юк.Bst DNA Полимераз V2 полоса-күчерү, изотермаль көчәйтү лампасы (Loop арадаш изотермаль көчәйтү) һәм тиз эзлеклелек өчен бик уңайлы.Бу Bst ДНК полимераз V2 бүлмә температурасында ДНК полимераз эшчәнлеген тоткарлый ала, шулай итеп ул эшли ала һәм реакция системасы бүлмә температурасында формалаша ала, конкрет булмаган көчәйтүне булдырмый һәм реакциянең эффективлыгын күтәрә, һәм бу версия булдыра ала. лиофилизацияләнергә.Моннан тыш, ул активлыгын югары температурада чыгарырга сәләтле, шулай итеп аерым активлаштыру адымы кирәклеген бетерә.
Компонентлар
Компонент | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst ДНК полимераз V2 (Глицеролсыз) (32U / μL) | 0,05 мл | 0,25 мл | 2,5 мл |
10 × HC Bst V2 буфер | 1,5 мл | 2 × 1,5 мл | 3 × 10 мл |
MgSO4 (100мМ) | 1,5 мл | 2 × 1,5 мл | 2 × 10 мл |
Кушымталар
1.Лампа изотермаль көчәйтү
2.ДНК полосасы бер күчерү реакциясе
3.Gгары GC ген эзлеклелеге
4.Нанограмма дәрәҗәсенең ДНК эзлеклелеге.
Саклау торышы
0 ° C астында транспорт һәм -25 ° C ~ -15 ° C сакланырга тиеш.
Берәмлек төшенчәсе
Бер агрегат 25 нмол dNTPны кислотада эри торган материалга 30 минутта 65 ° C температурада кертә торган фермент күләме дип билгеләнә.
Лампа реакциясе
Компонентлар | 25 μLСистема |
10 × HC Bst V2 буфер | 2,5 μЛ |
MgSO4 (100мМ) | 1,5 μЛ |
dNTP (һәрберсе 10мМ) | 3,5 μЛ |
SYTO ™ 16 Яшел (25 ×)a | 1,0 μЛ |
Пример катнашмасыb | 6 μЛ |
Bst DNA полимераз V2 (Глицеролсыз) (32 U / uL) | 0,25 μЛ |
Шаблон | × μL |
ddH₂O | 25 μЛ кадәр |
Искәрмәләр:
1) а.SYTOTM 16 Яшел (25 ×): Эксперимент ихтыяҗлары буенча, башка буяулар алмаштыргыч буларак кулланылырга мөмкин;
2) б.Пример катнашмасы: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB һәм башка томнарны кушып алынган.
Реакция һәм шарт
1 × HC Bst V2 Буфер, инкубация температурасы 60 ° C белән 65 ° C арасында.
Atылылык инакивациясе
80 ° C, 20мин.