Startылы старт Bst 2.0 ДНК полимерасы (Глицерол бушлай)

Bst DNA полимераз V2 Bacillus stearothermophilus DNA полимераз I-дән алынган, аның 5 ′ → 3 ′ ДНК полимераз активлыгы һәм чылбырны алыштыру активлыгы бар, ләкин 5 ′ → 3 ′ экзонуклаз активлыгы юк.Bst DNA Полимераз V2 полоса-күчерү, изотермаль көчәйтү лампасы (Loop арадаш изотермаль көчәйтү) һәм тиз эзлеклелек өчен бик уңайлы.Bst DNA полимераз V2 - Bst DNA полимераз V2 (HC5005A) нигезендә кайнар старт версиясе, кире модификация технологиясе белән алынган, ул бүлмә температурасында ДНК полимераз эшчәнлеген тыя ала, шуңа күрә реакция системасы эшләнә һәм бүлмә температурасында булмаган булырга мөмкин. - махсус көчәйтү һәм реакция эффективлыгын яхшырту, һәм бу версия лиофилизацияләнергә мөмкин.Моннан тыш, аның активлыгы югары температурада чыгарыла, шуңа күрә аерым активлаштыру адымы кирәк түгел.

Компонентлар

Bst ДНК полимераз V2 (Глицеролсыз) (8U / μL)

Кушымталар

1.Лампа изотермаль көчәйтү

2.ДНК полосасы бер күчерү реакциясе

3.Gгары GC ген эзлеклелеге

4.Нанограмма дәрәҗәсенең ДНК эзлеклелеге.

Саклау торышы

0 ° C астында транспорт һәм -25 ° C ~ -15 ° C сакланырга тиеш.

Берәмлек төшенчәсе

Бер агрегат 25 нмол dNTPны кислотада эри торган материалга 30 минутта 65 ° C температурада кертә торган фермент күләме дип билгеләнә.

Сыйфат белән идарә итү

1.Протеин чисталыгын тикшерү (SDS-PAGE):Bst DNA полимераз V2 чисталыгы ≥99%, Coomassie Blue ачыклау ярдәмендә SDS-PAGE анализы белән билгеләнә.

2.EndonucleaseЭшчәнлек:50 μL реакция инкубациясе минимум 8 U Bst ДНК полимераз V2 белән 1 μг λDNA белән 16 at 37 сәгатьтә 37 at вакытында инкубацияләү билгеләнгән деградациягә китерми.

3.Эшчәнлек:50 μL реакция инкубациясе, минимум 8 U Bst ДНК полимераз V2 белән 1 μg λ -Hind Ⅲ 16 сәгать дәвамында ДНКны 37 Ⅲ ашату, билгеләнгән деградациягә китерми.

4.Никаз эшчәнлеге:50 μL реакция инкубациясе минимум 8 U Bst ДНК полимераз V2 булган 1 μg pBR322 ДНК белән 16 сәг.

5.RNase эшчәнлеге:50 μL реакция инкубациясе минимум 8 U Bst DNA полимераз V2 булган 1,6 μg MS2 RNA белән 16 ° 37 градус җылылыкта 16 сәгать дәвамында инкубация билгеләнгәнчә деградациягә китерми.

6.E. coliДНК:120 U of Bst DNA полимераз V2, E. coli 16S rRNA локусы өчен махсус праймериз белән TaqMan qPCR кулланып, E. coli геномик ДНК булуы өчен тикшерелә.E. coli геномик ДНК пычрануы ≤1 Күчермә.

Лампа реакциясе

Искәрмәләр:

1) а.SYTOTM 16 Яшел (25 ×): Эксперимент ихтыяҗлары буенча, башка буяулар алмаштыргыч буларак кулланылырга мөмкин;

2) б.Пример катнашмасы: 20 µ M FIP, 20 µ M BIP, 2,5 µ M F3, 2,5 µ M B3, 5 µ M LF, 5 µ M LB һәм башка томнарны кушып алынган.

Реакция һәм шарт

1 × HC Bst V2 Буфер, инкубация температурасы 60 ° C белән 65 ° C арасында.

Atылылык инакивациясе

 80 ° C, 20мин