Ultra Nuclease
UltraNuclease - Серратия маркесеннарыннан алынган генетик инженер-дендонуклаз, ул ДНКны яки РНКны деградацияләргә сәләтле, ике яки бер катлы, сызыклы яки түгәрәк, төрле шартларда, нуклеин кислоталарын 5'-монофосфат олигонуклеотидларга 3-5 база озынлыгы белән деградацияли. .Генетик инженерия модификациясеннән соң, продукт ферментланган, белдерелгән һәм чистартылган Эшеричия коли (Э. coli), бу күзәнәк супернант һәм күзәнәк лизатының фәнни тикшеренүләрен киметә, шулай ук протеинның чистарту эффективлыгын һәм функциональ тикшеренүләрен яхшырта.Бу шулай ук ген терапиясендә, вирусны чистартуда, вакцина җитештерүдә, протеинанд полисахарид фармацевтика сәнәгатендә нуклеин кислотасын чыгару реагенты буларак кулланылырга мөмкин.
Продукция үзенчәлекләре
| CAS No. | 9025-65-4 |
| EC No. | |
| Молекуляр авырлык | 30кДа |
| Изоэлектрик пункт | 6.85 |
| Протеин чисталыгы | ≥99% （SDS-PAGE & SEC-HPLC） |
| Конкрет эшчәнлек | ≥1.1 × 106U / мг |
| Оптималь температура | 37 ° C. |
| Оптималь рН | 8.0 |
| ProteaseActivity | тискәре |
| Биобурден | ＜ 10CFU / 100,000U |
| Калган хуҗа-күзәнәк протеины | ≤10ppm |
| Авыр металл | ≤10ppm |
| Бактерияле Эндотоксин | ＜ 0.25EU / 1000U |
| Саклау буферы | 20мм Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 ， 20mM NaCl ， 50% Глицерол |
Саклау шартлары
Transportation0 ° C ташу ； -25 ~ -15 ° C Саклау ， 2 ел куллану (туңдырудан сакланыгыз).
Берәмлек төшенчәсе
° A260 үзләштерү кыйммәтен 30 минут эчендә 37 ° C, pH 8.0 үзгәртү өчен кулланылган фермент күләме, олигонуклеотидларга киселгән 37μг лосось спермасы ДНКга тиң булган эквивалент, актив берәмлек (U) итеп билгеләнде.
Сыйфат белән идарә итү
Калган хуҗа-күзәнәк протеины: ELISA комплекты
•Протеаз Калдыклар: 250КУ / мл UltraNuclease субстрат белән 60 минутка реакция ясады, бернинди активлык табылмады.
•Бактерияле Эндотоксин: LAL-тест, Кытай Халык Республикасының фармакопоясы 4 том (2020 чыгарылыш) гел лимит сынау ысулы.Гомуми кагыйдәләр (1143).
•Биобурден: Кытай Халык Республикасы фармакопоиясе 4 том (2020 чыгарылыш) - Генераль
Бала тудыру кагыйдәләре (1101), PRC Милли Стандарт, ГБ 4789.2-2016.
•Авыр металл:ICP-AES, HJ776-2015.
Операция
UltraNuclease эшчәнлеге SDS концентрациясе 0,1% тан артык булганда яки EDTA булганда бик нык тыелган
концентрациясе 1ММ-дан артык иде.
концентрациясе 1,5% тан түбән булганда.
| Операция | Оптималь операция | Дөрес эш |
| Температура | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
| Mg2 + | 1-2мМ | 1- 15мм |
| DTT | 0- 100мм | > 100мм |
| 2-Меркаптоетанол | 0- 100мм | > 100мм |
| Моновалент металл ионы （Na +, K + һ.б.） | 0-20мМ | 0-200мМ |
| PO43- | 0- 10мм | 0- 100мм |
Куллану һәм дозасы
• Вакцина продуктларыннан экзоген нуклеин кислотасын чыгарыгыз, калдыклы нуклеин кислотасының агулану куркынычын киметегез һәм продукт куркынычсызлыгын яхшыртыгыз.
• Нуклеин кислотасы китергән азык сыеклыгының ябышлыгын киметү, эшкәртү вакытын кыскарту һәм протеин җитештерүчәнлеген арттыру.
• Уңайлы кисәкчәләрне (вирус, кертү органы һ.б.) уралган нуклеин кислотасын чыгарыгыз
кисәкчәне чыгару һәм чистарту өчен.
| Эксперименталь төр | Протеин җитештерү | Вирус, вакцина | Күзәнәк наркотиклары |
| Күзәнәкләр саны | 1г күзәнәкнең дым авырлыгы (10мл буфер белән реанимацияләнгән) | 1Л ферментациясе сыек супернант | 1Л культурасы |
| Минималь доза | 250U | 100U | 100U |
| Тәкъдим ителгән доза | 2500U | 25000U | 5000U |
• Нуклеаз белән эшкәртү багана хроматографиясе, электрофорез һәм блотлау анализы өчен үрнәкнең резолюциясен һәм торгызылуын яхшырта ала.
• Ген терапиясендә чистартылган адено белән бәйле вируслар алу өчен нуклеин кислотасы чыгарыла.
