Бер адым тиз RT-qPCR Проб премикс-УНГ
Мәче No: HCR5143A
Бер адым RT-qPCR Проб комплекты (Тиз арада) - тикшерү нигезендә RT-qPCR тиз ачыклау комплекты, бер плекс яки мультиплекс санлы PCR өчен шаблон буларак RNA кулланып (RNA вирусы кебек).Бу продукт яңа буын антитела-үзгәртелгән Так ДНК Полимеразын һәм бер адымлы махсус Кире Транскриптазны куллана, тиз көчәйтү өчен оптимальләштерелгән буфер, тизрәк көчәйтү тизлеге, көчәйтү эффективлыгы һәм үзенчәлеге.Ул кыска вакыт эчендә бер-плекста да, мультиплекста да балансланган көчәйтүне хуплый.
Компонентлар
1. 5 × RT-qPCR буферы (U +)
2. Фермент катнашмасы (U +)
Искәрмәләр:
а.5 × RT-qPCR буферы (U +) dNTP һәм Mg кертә2+;
б.Фермент катнашмасы (U +) кире транскриптаз, Hot Start Taq DNA полимерасы, RNase ингибиторы һәм UDG;
в.RNase-бушлай киңәшләр, EP трубалары һ.б. кулланыгыз.
Кулланганчы, 5 × RT-qPCR буферын (U +) яхшылап кушыгыз.Эрегәннән соң явым-төшем булса, буферның бүлмә температурасына кайтуын көтегез, кушыгыз һәм эрегез, аннары аларны гадәти кулланыгыз.
Саклау шартлары
Продукция коры боз белән җибәрелә һәм -25 ~ -15 atта 1 ел сакланырга мөмкин.
Инструкция
1. Реакция Система
| Компонентлар | Күләм (20 μЛ реакция) |
| 2 × RT-qPCR буферы | 4μL |
| Фермент катнашмасы (U +) | 0.8μL |
| Праймер Алга | 0,1 ~ 1,0μМ |
| Пример кире | 0,1 ~ 1,0μМ |
| TaqMan Probe | 0.05 ~ 0.25μM |
| Шаблон | X μL |
| РНазсыз су | 25μL кадәр |
Искәрмәләр: реакция күләме 10-50μL.
2. Велосипед протоколы (С.тандард)
| Cyикл адым | Темп. | Вакыт | Cyикллар |
| Кире транскрипция | 55 ℃ | 10 мин | 1 |
| Башлангыч денатурация | 95 ℃ | 30 сек | 1 |
| Денатурация | 95 ℃ | 10 сек | 45 |
| Аннальинг / киңәйтү | 60 ℃ | 30 сек |
| Велосипед протоколы (Тиз) Cyикл адым |
Темп. |
Вакыт |
Cyикллар |
| Кире транскрипция | 55 ℃ | 5 мин | 1 |
| Башлангыч денатурация | 95 ℃ | 5 с | 1 |
| Денатурация | 95 ℃ | 3 с | 43 |
| Аннальинг / киңәйтү | 60 ℃ | 10 с |
Искәрмәләр:
а.Кире транскрипция температурасы 50 ℃ белән 60 between арасында, температураны күтәрү катлаулы структураларны һәм югары CG эчтәлекле шаблоннарны көчәйтергә ярдәм итә;
б.Оптималь аннальинг температурасы праймерның Tm кыйммәтенә карап көйләнергә тиеш, һәм Real Time PCR коралы нигезендә флуоресцент сигнал җыю өчен иң кыска вакытны сайларга кирәк.
Искәрмәләр
Сәламәтлекне һәм куркынычсызлыкны тәэмин итү өчен кирәкле PPE, шундый лаборатория пальто һәм перчаткалар киегез!
