Мультиплекс Бер адым RT-qPCR Премикс
Тасвирлау
Мәче No: HCR5141A
Мультиплекс Бер адым RT-qPCR Премикс - шаблон буларак РНК нигезендә мультиплекс санлы PCR комплекты.Экспериментта кире транскрипция һәм санлы PCR бер үк реакция трубасында башкарыла, эксперименталь операцияне гадиләштерә һәм пычрану куркынычын киметә.Буфер һәм фермент катнашмасының уникаль дизайны бер этаплы лиофилизацияләнгән системада кулланылырга мөмкин.Комплект җылылыкка чыдам Кире Транскриптазны куллана, санны көчәйтү өчен Hotstart Taq DNA Полимеразын кулланып, беренче полосалы CDNAны эффектив синтезлау өчен.Анда оптимальләштерелгән реакция буферы, ферментлар катнашмасы һ.б. бар, һәм махсус булмаган PCR көчәйтүне эффектив тыя торган һәм күп qPCR реакцияләренең көчәйтү эффективлыгын арттыручы факторлар өстәлде, примерларның көчәйтү эффективлыгын тәэмин иткәндә берничә флуоресцент санлы көчәйтү мөмкинлеге бирелде.
Компонентлар
| Исем |
| 1. Лю-Бафер |
| 2. Lyo-Enzyme Mix |
| 3. Lyo саклаучы |
Транспортион
А: Lyo-буфер һәм саклаучы: -25 ~ -15 ℃, саклану вакыты 1 ел.
Б: Лио-фермент катнашмасы, 2-8 ℃, саклану вакыты 6 ай.
Эшләү өчен күрсәтмә
1. Реакция системасы (мисал итеп 25μL алыгыз)
| Компонентлар | Күләм (μL) | Соңгы концентрация |
| Лю-Бафер | 6 | 1* |
| Lyo-Enzyme Mix | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Пример Микс (10μM) | 1 | 0.1- 1уМ |
| Проб Микс (10μM) | 0,5 | 0.05-0.5uM |
| РНК шаблоны | 5 | - |
| DEPC H2O | 25 гә кадәр | - |
2. Оптималь велосипед протоколы
1) Велосипедта стандарт протокол
| Реакция этабы | Температура | Вакыт | Cyикл | |
| 1 | Кире транскрипция | 50 ° C.a | 10мин | 1 |
| 2 | Башлангыч денатурация | 95 ° C. | 5мин | 1 |
| 3 | Көчләндерү реакциясе | 95 ° C. | 15сек | 45 цикл |
| 60 ° C.b | 30секc |
2) Велосипедта тиз протокол
|
| Реакция этабы | Температура | Вакыт | Cyикл |
| 1 | Кире транскрипция | 50 ° C.a | 2мин | 1 |
| 2 | Башлангыч денатурация | 95 ° C. | 2сек | 1 |
| 3 | Көчләндерү реакциясе | 95 ° C. | 1сек |
45 цикл |
| 60 ° C.b | 13секc |
Тамга:
a) Кире транскрипция: Температура 10-15 минут эчендә 42 ° C яки 50 ° C сайлый ала.
b) Көчләндерү реакциясе: Температура эшләнгән праймерларның Tm кыйммәте буенча көйләнә.
в)Флуоресцент сигнал алу: Зинһар, эксперимент процедурасын таләпләренә туры китереп куегызинструмент кулланмасы.
Техник мәгълүмат / спецификацияләр
| Кайнар старт | Эчке кайнар старт |
| Ачыклау ысулы | Праймер-зонаны ачыклау |
| PCR ысулы | Бер адым RT-qPCR |
| Ampleрнәк төре | РНК |
Искәрмәләр
1. Бу продукт тикшерү өчен генә.
2. Зинһар өчен, сәламәтлекне һәм куркынычсызлыкны тәэмин итү өчен кирәкле PPE, шундый лаборатория пальто һәм перчаткалар киегез！
