CHO HCP ELISA комплекты
Бу анализда бер адымлы иммуносорбент ELISA ысулы кулланыла.CHOK1 HCP булган үрнәкләр бер үк вакытта HRP маркалы кәҗә анти-CHOK1 антителасы һәм ELISA тәлинкәсендә капланган анти-CHOK1 антителасы белән реакцияләнә, ниһаять, каты фазалы антитела-HCP маркалы антитела сандвич комплексын барлыкка китерә.Чикләнмәгән антиген-антитела ELISA тәлинкәсен юып бетерергә мөмкин.ТМБ субстраты коега җитәрлек реакция өчен кушыла.Тукталыш эремәсе кушылганнан соң төс үсеше туктатыла, һәм 450/650nm реакция эремәсенең OD яки үзләштерү бәясе микроплит укучы белән укыла.ОД кыйммәте яки сеңдерү бәясе эремәдәге HCP эчтәлегенә пропорциональ.Моннан, эремәдәге HCP концентрациясе стандарт сызык буенча исәпләнә ала.
Кушымта
Бу комплект CHOK1 хуҗалыгында күзәнәк протеин калдыкларының күләмен ачыклау өчен кулланыла.
Cкомпонентлар
| S / N. | Компонент | Концентрация | Саклау шартлары |
| 1 | CHOK1 HCP стандарты | 0,5мг / мл | ≤ - 20 ℃ |
| 2 | Анти-ЧО HCP-HRP | 0,5мг / мл | ≤ - 20 ℃, яктылыктан саклагыз |
| 3 | ТМБ | NA | 2-8 ℃, яктылыктан саклагыз |
| 4 | 20 × ПБСТ 0,05% | NA | 2-8 ℃ |
| 5 | Чишелешне туктатыгыз | NA | RT |
| 6 | Микроплит сатучылар | NA | RT |
| 7 | BSA | NA | 2-8 ℃ |
| 8 | Adгары adsorption алдан каплау тәлинкәләре | NA | 2-8 ℃ |
Equipmentиһаз кирәк
| Кулланучылар / җиһазлар | Manufactитештерү | Каталог |
| Микроплит укучы | Молекуляр җайланмалар | Спектра Макс M5, M5e, яки эквивалент |
| Термомиксер | Эппендорф | Eppendorf / 5355, яки эквивалент |
| Вортекс миксеры | ИКА | MS3 Санлы, яки эквивалент |
Саклау һәм тотрыклылык
1.Транспорт -25 ~ -15 ° C.
2.Саклау шартлары 1 нче таблицада күрсәтелгәнчә;1-2 компонентлары ≤ - 20 ° C, 5-6 ТР, 3 stored саклана4、7、8 2-8 at саклана;куллану вакыты 12 ай.
Продукция параметрлары
1.Сәнгатьчәнлек: 1нг / мл
2.Ачыклау диапазоны: 3- 100нг / мл
3.Төгәллек: Эчтәлекле CV≤ 10%, арада CV≤ 15%
4.HCP яктырту:> 80%
5.Specзенчәлек: Бу комплект универсаль, чөнки ул чистарту процессыннан бәйсез CHOK1 HCP белән реакциядә.
Реагент әзерләү
1.ПБСТ 0,05%
15 мл 20 × ПБСТ 0,05% алыгыз, ddHда эретелгән2О, һәм 300 млга кадәр.
2.1,0% BSA
Шешәдән 1г BSA алыгыз һәм 100 мл ПБСТ 0,05% эретегез, тулысынча эреп беткәнче яхшылап кушыгыз һәм 2-8 ° C саклагыз.Әзерләнгән эретү буферы 7 көн эшли.Кирәк булганда әзерләнергә киңәш ителә.
3.Ачыклау чишелеше 2μg / мл
48μL 0,5 мг / мл анти-CHO HCP-HRP алыгыз һәм 2μg / mL ачыклау эремәсенең соңгы концентрациясен алу өчен 11% 952μL 1% BSA белән эретегез.
4.QC һәм CHOK1 HCP стандартларын әзерләү
| Труба No.к. | Оригиналь | Концентрация | Том | 1% BSA | гомуми күләм | Финал |
| A | Стандарт | 0,5мг / мл | 10 | 490 | 500 | 10,000 |
| B | A | 10,000 | 50 | 450 | 500 | 1000 |
| S1 | B | 1.000 | 50 | 450 | 500 | 100 |
| S2 | S1 | 100 | 300 | 100 | 400 | 75 |
| S3 | S2 | 75 | 200 | 175 | 375 | 40 |
| S4 | S3 | 40 | 150 | 350 | 500 | 12 |
| S5 | S4 | 12 | 200 | 200 | 400 | 6 |
| S6 | S5 | 6 | 200 | 200 | 400 | 3 |
| NC | NA | NA | NA | 200 | 200 | 0 |
| QC | S1 | 100 | 50 | 200 | 250 | 20 |
Таблица: QC һәм стандартлар әзерләү
Тикшерү процедурасы
1.Aboveгарыдагы "Реагент әзерләү" дә күрсәтелгәнчә реагентларны әзерләгез.
2.Wellәр скважинага 50μL стандартлар, үрнәкләр һәм QC алыгыз (3 таблицаны карагыз), аннары 100μL ачыклау эремәсе (2μg / mL) кушыгыз;Тәлинкәне мөһер белән каплагыз, термомиксерга ELISA тәлинкәсен куегыз.500 сәгатьтә, 25 ± 3 2 2 сәгать инкубацияләгез.
3.Микроплитны резинкага әйләндерегез һәм каплау эремәсен ташлагыз.ELISA тәлинкәсен юарга һәм эремәне ташларга, юуны 3 тапкыр кабатларга, һәр коега 300μL ПБСТ 0,05% торба.Тәлинкәне чиста кәгазь сөлгегә әйләндерегез һәм киптерегез.
4.Wellәр коега 100μL ТМБ субстратын өстәгез (1 таблицаны карагыз), ELISA тәлинкәсен мөһерләгез, һәм караңгыда 25 ± 3 at 15 минутта инкубацияләгез.
5.Pipәр коега 100μL тукталыш чишелеше.
6.Микроплит укучы белән 450 / 650nm дулкын озынлыгында үзләштерүне үлчәгез.
7.SoftMax яки эквивалент программа ярдәмендә мәгълүматны анализлау.Дүрт параметрлы логистик регрессия моделен кулланып стандарт сызык.
Стандарт сызык үрнәге
Искәрмә: Әгәр үрнәктә HCP концентрациясе стандарт сызыкның югары чигеннән артса, аны сынау алдыннан эретү буферы белән дөрес эретергә кирәк.
Искәрмәләр
Тукталыш эремәсе - 2М күкерт кислотасы, чәчмәсен өчен сак булыгыз!
