BspQI
BspQI рекомбинант рәвештә Э.Колида күрсәтелергә мөмкин, ул билгеле сайтларны таный ала һәм астында җитештерелә
BspQI, IIs чикләү эндонуклазы чикләү эндонуклаз, рекомбинант Э. coli штаммыннан алынган, ул клонланган һәм үзгәртелгән BspQI генын Bacillus sphaericusдан алып тора.Ул билгеле сайтларны таный ала, һәм танылу эзлеклелеге һәм ярылу сайтлары түбәндәгечә:
5 '· · · · GCTCTTC (N) · · · · · · · · 3 ·'
3 '· · · · CGAGAAG (NNNN) · · · · 5'
Продукция үзенчәлекләре
1. activityгары активлык, тиз ашкайнату;
2. "Скальпель" кебек төгәл кисүне тәэмин итүче түбән йолдызлык активлыгы;
3. BSA һәм хайваннардан бушлай;
Метиляция сизгерлеге
Dмин метиляция:Сәнгатьле түгел;
Dсм метиляция:Сәнгатьле түгел;
CpG метиляциясе:Сәнгатьле түгел;
Саклау шартлары
Продукция ≤ 0 be җибәрелергә тиеш;-25 ~ - 15 ℃ шартта саклагыз.
Саклау буферы
20мм Трис-ХКл, 0,1ММ ЭДТА, 500 мм ККл, 1,0 мм дитиотрейтол, 500 µг / мл Рекомбинант Альбумин, 0. 1% Тритсия X- 100 һәм 50% глицерол (pH 7.0 @ 25 ° C).
Берәмлек төшенчәсе
Бер агрегат 1µг эчке контроль ДНКны 1 сәгать эчендә 50 ° C температурада 50 µL күләмендә ашату өчен кирәк булган фермент күләме дип билгеләнә.
Сыйфат белән идарә итү
Протеин чисталыгын тикшерү (SDS-PAGE):BspQI чисталыгы ≥95% SDS-PAGE анализы белән билгеләнде.
RNase:10U BspQI 1,6μg MS2 RNA белән 4 сәгатьтә 50 at 50 агароза гели электрофорезы белән билгеләнгәнчә деградация китерми.
Конкрет булмаган DNase эшчәнлеге:10U BspQI белән 1μg λ ДНК 50 at 16 сәгать эчендә, 50 with белән 1 сәгать эчендә, агароза гели электрофорезы белән билгеләнгән артык ДНК бирми.
Суд һәм рекутинг:10U BspQI белән 1 μg λDNA ашказаны ашаганнан соң, ДНК фрагментлары T4 DNA лигасы белән 16ºC температурада бәйләнергә мөмкин.Theseәм бу бәйләнгән фрагментларны BspQI белән кабатларга мөмкин.
E. coli ДНК: E. coli 16s rDNA-махсус TaqMan qPCR ачыклау күрсәткәнчә, E.coli геном калдыклары ≤ 0.1pg / ul.
Протеин калдыклары:≤ 50 ppm
Бактерия Эндотоксин: LAL-тест, Кытай фармакопоя IV 2020 басмасы буенча, гель лимитын сынау ысулы, гомуми кагыйдә (1143).Бактерияле эндотоксин күләме EU10 ЕС / мг булырга тиеш.
Реакция системасы һәм шартлары
| Компонент | Том |
| BspQ I (10 U / μL) | 1 μЛ |
| ДНК | 1 μг |
| 10 x BspQ I буфер | 5 μЛ |
| dd H2O | 50 μЛ кадәр |
Реакция шартлары ： 50 ℃, 1 ~ 16 с.
20 минутта җылылык инакивациясе ： 80 ° C.
Тәкъдим ителгән реакция системасы һәм шартлары чагыштырмача яхшы ферментларның ашкайнату эффектын тәэмин итә ала, бу бары тик белешмә өчен, детальләр өчен эксперимент нәтиҗәләренә мөрәҗәгать итегез.
Продукция кушымтасы
Эндонуклазны ашатуны чикләү, Тиз клонлау.
Искәрмәләр
1. Реакция күләменең ≤ 1/10 фермент күләме.
2. Йолдызлык активлыгы глицерол концентрациясе 5% тан артык булганда булырга мөмкин.
3. Тәкъдим ителгән нисбәттән түбән субстрат булганда ярылу эшчәнлеге булырга мөмкин.
